毛細血管電泳儀取樣技術要求很高,規范操作很重要

更新時間：2021-02-24

點擊次數：1665

　　毛細血管電泳儀是一種用于生物領域的分析儀器，它以毛細管為分離通道，以高壓DC電場為驅動力，利用帶電粒子之間的遷移率差和分布系數差進行分離。它的出現使分析科學繼液相色譜之后又一次大的進步，使分析科學從微升級到納米升級，不僅使單細胞甚至單分子分析成為可能。用于分析時，取樣技術要求很高，用戶在使用時應規范操作

　　1.注射區越小越好：

　　無論采用何種進樣方式，毛細管插入樣品溶液的深度一般小于毛細管總長度的1% ~ 2%，以盡量減小樣品溶液被毛細吸收到毛細管中的影響樣品管中的溶液小于5L，進樣量為1 ~ 50 NL。

　　2.注射時間應該短：

　　通常注射時間為0.5 ~ 1s，此時粘附在毛細管上的樣品量相對于吸入量可以忽略不計。

　　雖然毛細血管電泳儀的進樣時間可以達到0.1s，但當毛細管插入樣品管時，不可避免地會有一些溶液粘附，因此進樣時間短會影響分析的重復性。

　　3.樣品的預濃縮：

　　受毛細管總體積的限制，毛細管電泳不能像高效液相色譜那樣通過增加進樣量來提高檢測靈敏度，但可以采取一些措施來提高靈敏度。

　　首先當樣品緩沖液的電導率明顯低于電泳緩沖液的電導率(100倍以上)時，在毛細管兩端施加電壓后，可在樣品區帶前后形成較大的電場，使樣品溶液中的分子遷移更快。當這些分子到達電泳緩沖液的邊界時，由于電場的減弱，遷移速度變慢，使得樣品區帶變窄，濃度增加，從而達到濃縮的目的。

　　其次當樣品緩沖液的電導率與電極緩沖液相同，且樣品濃度相對較薄，不適合進一步稀釋時，可在注射前吸入部分水，也可達到濃縮的目的。

　　不管采用什么樣的進樣方法，上述方法都能使樣品積累和濃縮。然而由于堆積區地區的電位急劇下降，該地區的溫度將會上升。

　　4.將毛細管插入樣品溶液后，應立即開始取樣操作，完成后，應迅速移至緩沖液中開始電泳。否則，會出現毛細和虹吸現象，導致誤差和光譜帶變寬。

　　5.盡可能保持系統不變。因為溫度直接影響粘度，所以影響恒定的注入量。